6.6 土拉杆菌

6.6.1 食品卫生学意义

土拉杆菌（Francisella tularense）又称土拉弗朗西斯杆菌，能引起人和多种动物的热性传染病，称为土拉杆菌病，亦称为野兔热。本菌属有两个种，即土拉弗朗西斯菌（F.tularensis）和新凶手弗朗西斯菌（F.novicida），前者是人和动物野兔热的病原菌，后者仅能引起实验动物的感染。

本病主要传染源为野兔和啮齿动物，其他野生动物、家畜、家禽感染后也可成为传染源。人对本菌高度敏感，虽少量细菌进入体内即可致病。

本菌的传播途径一般以直接接触和吸血昆虫叮咬较多见。直接与感染动物接触或被染菌昆虫叮咬；摄入污染食物和水；吸入污染空气均可使人感染土拉杆菌病。

人体感染后，潜伏期3～5d，突然发病、寒颤发热、伴有剧烈头痛、盗汗、食欲减退，少数可见皮疹，多数有肝脾肿大，一般病程2～3周。

本病分布甚广，主要见于欧、美各国。我国自1957年首次从黄鼠体内分出本菌后，又从野兔和病人体内分离证实。到目前许多省市都已发现病例。

6.6.2 生物学特性

（1）形态与染色特征 本菌大小0.2μm×（0.2～0.7）μm。在固体培养基上的幼龄培养物形态一致，陈旧培养物中呈多形性，有球形、杆形、长丝形。在动物组织内呈球状或杆状，并在菌体周围有一层较薄的类荚膜样透明带。无鞭毛或芽胞，革兰氏染色阴性，美兰染色呈两极着染。

（2）培养特性 本菌为专性需氧菌，营养要求较高，在普通培养基中不能生长，需要加入血液、卵黄、葡萄糖胱氨酸等营养丰富的物质才能生长。最适生长温度37℃，最适pH值为6.9～7.2。

在含血液的葡萄糖胱氨酸培养基上生长较慢，3～4d后菌落如黏液状水滴，灰白色、光滑、圆形，菌落周围有绿色变色区，但非真正溶血。

（3）生化特性 本菌发酵糖类和醇的能力较弱，能发酵葡萄糖产酸不产气；在含有半胱氨酸的培养基中能产生硫化氢，不形成靛基质；能分解尿素，还原美兰、孔雀绿；不还原刚果红；不能还原硝酸盐为亚硝酸盐。

（4）抗原构造与分型 土拉杆菌只有一个免疫型，有三种主要抗原。多糖抗原，在患者康复后注入该抗原至皮内，能即刻引起风团和红疹性皮肤反应。细胞壁和包膜抗原，具有内毒素活性，与免疫保护有关。蛋白抗原与迟发型变态反应有关，与布鲁氏菌抗原有交叉反应。

（5）致病性 土拉杆菌对多种动物和人具有病原性。其致病性与动物有关，菌的自溶物有毒性，可使动物死亡。但人与人之间的传染罕见，人的感染通常是动物接触所致，细菌穿入没有破损的皮肤和黏膜而引起感染。在人和动物的器官和组织中出现腹股沟淋巴结炎和坏死的区域。对豚鼠或小白鼠高度敏感，1个菌即可引起感染。人的皮内感染剂量为10个菌；气雾途径感染剂量为10～50个菌（图6-6-1）。

（6）抵抗力 本菌对外界抵抗力较强，于冻结的组织内能存活12个星期，在4℃的水或潮湿的土壤中可存活4个月以上，且毒力不降低。死于该菌感染动物的尸体在低温下可存活6～9个月，在腌肉中可存活31d。对热抵抗力不强，56℃10min即可被杀死；日光直射可存活20～30min；紫外线照射立即死亡。对一般消毒药抵抗力亦不强，2%～3%来苏儿、1‰氯化汞（俗称升汞）5min死亡；对甲醛、酒精均无耐受性。对链霉素、氯霉素和四环素敏感。

6.6.3 细菌学检验

（1）分离培养 检样直接接种于胱氨酸葡萄糖血液琼脂或凝固卵黄培养基上，37℃温箱中培养，形成圆形、光滑、灰色、突起、有黏性的菌落；与此同时，制备涂片，做美兰染色和革兰氏染色进行镜检。

（2）动物试验 将检样稀释制成1∶（5～10）乳剂，接种于豚鼠腹腔内，剂量4～8mL，一般于5～10d动物死亡，病变明显，脏器中有大量病原菌存在且可分离纯培养。

（3）血清学试验 人的土拉杆菌病诊断主要靠血清学试验。其中定量凝集反应应用普遍，准确率高，不仅用于确定诊断，也可用于家畜和某些低敏感野生动物的检查。因高敏感动物一般不产生凝集素抗体，故不能用此法检测。

（4）分子生物学检测方法 分子生物学技术和对土拉杆菌的进一步认识为研究高度特异、灵敏、快速和方便的诊断方法提供了可能性。目前快速诊断方法有以下几种：各种ELISA、免疫印迹、脉冲电泳和各种PCR。

6.6.4 卫生评价与处理

① 割除病变部，废弃病变器官，肉尸及其内脏经高温处理后出场。

② 血液和全部废弃物作工业用或销毁。皮张消毒后出场。

③ 屠宰可疑患野兔热的病畜时，工作人员应严格执行个人的防护措施。

④ 发现病畜后，立即向有关部门报告疫情。